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液相色谱是否高效与操作员的使用习惯有很大关系

发布日期:2018-09-19 10:17来源:未知
  随着技术的不断发展与进步,液相色谱的应用范围不断扩大,使用人员对于其的使用水平也在不断提高,说到这里,液相色谱是否高效与使用人员的合理操作是密不可分的,正确的操作对于设备使用寿命有促进作用,接下来小编为大家介绍一下在液相色谱使用过程中应注意哪些事项。
  1、流动相使用前必须经脱气和过滤处理。
  2、更换色谱柱前,须对使用的色谱柱进行冲洗(如应用的流动相含有酸或无机盐,应当用20倍柱体积纯净水冲洗干净)、平衡后,保存在有机溶剂中(最好是乙腈或甲醇中)。
  3、取下色谱柱时,应立即将两端接头封口。除特殊情况外,一般都应使用预保护柱。
  4、测试完毕后,切忌直接用纯有机溶剂冲洗柱子,须用90%水-10%有机溶剂冲洗至少40min后,再用有机溶剂冲洗30min左右,最后将色谱柱保存在有机溶剂中。
  5、避免流动相组成及极性的剧烈变化。当流动相中含有缓冲溶液,不要直接切换到强溶剂,应该先用无缓冲流动相冲洗20~30min后,再更换强溶剂,更换流动相时,流速应不超过0.5ml/min。如果突然切换到高浓度有机溶剂,可能会使HPLC流动体系中的缓冲液沉淀,这样会导致更大的问题如柱头堵塞、管道堵塞、活塞损伤或进样阀转轴失灵。
  高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合,HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展,有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。HPLC成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。液相色谱- 质谱连用技术受到普遍重视,如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等;液相色谱- 红外光谱联用也发展很快,如在环境污染分析测定水中的烃类,海水中的不挥发烃类,使环境污染分析得到新的发展。
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